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冷冻研磨仪|老鼠内脏组织研磨实验

发布时间:2021-05-20 17:43   浏览:

  安徽省疾病预防控制中心毒理科病媒生物检测实验

 

  背(bei)景:鼠(shu)(shu)类不仅(jin)传播鼠(shu)(shu)疫、流行性出血热、钩(gou)端螺旋体病(bing)、斑疹伤(shang)寒等多(duo)种疾病(bing),严重危(wei)害人类健康;而(er)且通(tong)过啮咬、盗食、污染等方(fang)式给工业(ye)(ye)、农(nong)牧(mu)业(ye)(ye)生产(chan)等造(zao)成直接(jie)或间接(jie)的(de)经(jing)济损失(shi)。在此背(bei)景下(xia),通(tong)过深入细致(zhi)的(de)调(diao)研工作(zuo),了解(jie)鼠(shu)(shu)类防(fang)制(zhi)技术规范的(de)现状,并在遵循(xun)相关国家、行业(ye)(ye)标准的(de)基础上,编制(zhi)符合(he)深圳(zhen)市特点的(de)鼠(shu)(shu)类防(fang)制(zhi)技术规范,有(you)助于(yu)安全、有(you)效地预防(fang)和控(kong)制(zhi)鼠(shu)(shu)类,保护人民群众身体健康和生命安全,提升(sheng)安徽省的(de)环境(jing)卫生水平。

 

  一、材料和方法:

  样(yang)品(pin)来源于居(ju)民区及收治医(yi)院周围环境采集目标病媒生物。160份鼠(shu)肺样(yang)品(pin)来自本(ben)地,15份蜚蠊(lian)体表擦拭(shi)子(zi)来自安徽等地。所有(you)样(yang)品(pin)均冻(dong)存于-80度待检。

 

  二、仪器及试剂:

  1、净信全自动样品冷冻(dong)研磨仪(yi)

  2、荧光定量PCR分析仪

  3、高效病毒浓缩(suo)试剂盒

  4、巢(chao)式RT-PCR所采用的引物(wu),一步法RT-PCR试剂盒

  5、RNA提取试剂盒

 

  三(san)、

  1、样(yang)品(pin)RNA的(de)提(ti)取(qu)(qu)别取(qu)(qu)待检鼠肺组织于(yu)全自动样(yang)品(pin)冷冻(dong)研磨仪充分再加入异硫(liu)酸(suan)(suan)氰(qing)胍(gua)溶液,充分溶解后(hou)(hou)于(yu)负(fu)20度(du)(du)(du)保存备(bei)(bei)用,蜚蠊体(ti)表擦拭子(zi)中(zhong)(zhong)(zhong)加入无(wu)菌(jun)生理盐水(shui)少许于(yu)4度(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)过夜,挤压后(hou)(hou)取(qu)(qu)出棉拭子(zi),将剩余液体(ti)10000r/min离心(xin)5min,其上清液则用高效病毒(du)浓(nong)缩(suo)试剂(ji)盒进行浓(nong)缩(suo),浓(nong)缩(suo)所(suo)得的(de)晶体(ti)中(zhong)(zhong)(zhong)再加入异硫(liu)酸(suan)(suan)氰(qing)胍(gua)溶液,充分溶解后(hou)(hou)于(yu)负(fu)20度(du)(du)(du)保存备(bei)(bei)用,按照试剂(ji)盒的(de)说明(ming)从样(yang)品(pin)的(de)异硫(liu)酸(suan)(suan)氰(qing)胍(gua)溶液中(zhong)(zhong)(zhong)提(ti)取(qu)(qu)提(ti)取(qu)(qu)所(suo)得的(de)RNA于(yu)负(fu)20度(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)(zhong)保存备(bei)(bei)用。

  样品研磨前后效果图

 

  实验步骤:

  1、准备全自动样品冷冻(dong)研磨仪。

  2、金(jin)属适配器(qi),以(yi)及钢珠(zhu)适配器(qi)。

  3、将(jiang)老鼠组织剪碎,放入研(yan)磨管,加入钢珠。

  4、将适配器装入净信研磨仪中,开启低温(wen)功能保持温(wen)度。

  5、设(she)定(ding)参数,启动(dong)仪(yi)器至研磨(mo)程序(xu)结束,可(ke)得到如图所示样品。

 

  仪器介绍:

  全自动样品冷冻研磨仪:一种快速、高效、制冷的研磨系统。它能在非常短的时间内将土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等样品完成研磨、粉碎、混合机细胞破壁。广泛应用于生命科学、医药、生化、环境、地质、农业、林业、质检、材料等领域。

 

  优势:

  研磨(mo)效果具(ju)有(you)高(gao)度(du)可重现性

  触屏操作,可存(cun)储10条参数

  能(neng)够有效抑制核酸降解,保留蛋白质活(huo)性

  研磨时(shi)处于全封闭(bi)状态,无(wu)交(jiao)叉污染,低(di)噪(zao)音(yin)

  可轻松处(chu)理高(gao)韧(ren)塑(su)料、高(gao)强塑(su)料、树脂等难(nan)研磨(mo)样品

  具(ju)备安(an)全(quan)罩及安(an)全(quan)锁,无需涉及液氮操(cao)作(zuo),安(an)全(quan)性高

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